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elisa和wb哪種方法更準(zhǔn)確

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    發(fā)表于 2025-7-24 11:25:11 | 只看該作者 |倒序?yàn)g覽 |閱讀模式
    ELISA和WesternBlot(WB)的準(zhǔn)確性需根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐袛啵?ELISA在定量檢測(cè)方面更精確,而WB在特異性驗(yàn)證和蛋白質(zhì)信息分析上更具優(yōu)勢(shì)?。

    ?核心差異對(duì)比?

    ?1、檢測(cè)目的與準(zhǔn)確性側(cè)重?。

    ?ELISA?:

    專注于可溶性蛋白質(zhì)的?精確定量?,尤其在血清、細(xì)胞上清等體液樣本中,可檢測(cè)低至pg/ml的濃度。????

    通過標(biāo)準(zhǔn)曲線實(shí)現(xiàn)定量分析,適合高通量檢測(cè)(如96孔板),但無法區(qū)分同源蛋白或提供分子量信息。??

    ?WB?:

    通過電泳分離和抗體驗(yàn)證,提供蛋白質(zhì)存在的?特異性確認(rèn)?,可排除ELISA的假陽性/假陰性結(jié)果。??

    支持分子量測(cè)定及半定量分析,適用于復(fù)雜樣本(如細(xì)胞裂解液)中的目標(biāo)蛋白鑒定。??

    ?2、技術(shù)局限性比較?。

    ?ELISA的短板?:

    易受樣本基質(zhì)干擾,可能出現(xiàn)非特異性結(jié)合,影響特異性。??

    無法檢測(cè)蛋白質(zhì)翻譯后修飾或亞型差異。??

    ?WB的短板?:

    操作復(fù)雜耗時(shí)(1-2天),通量低,定量精度弱于ELISA。??

    需優(yōu)化電泳和轉(zhuǎn)膜條件,否則易出現(xiàn)背景噪音。??

    ?3、使用場(chǎng)景建議?

    ?優(yōu)先選擇ELISA的情況?:

    需要快速批量檢測(cè)(如臨床篩查或藥物開發(fā)中的濃度監(jiān)測(cè))。??

    樣本量有限或目標(biāo)蛋白豐度極低。??

    ?優(yōu)先選擇WB的情況?:

    驗(yàn)證ELISA結(jié)果或檢測(cè)蛋白質(zhì)分子量、修飾狀態(tài)。????

    分析膜蛋白或需從復(fù)雜混合物中分離目標(biāo)蛋白的場(chǎng)景。??

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    發(fā)表于 2025-10-27 16:52:24 | 只看該作者
    樓主的帖子總是這么精彩,每次都不會(huì)錯(cuò)過。
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    發(fā)表于 6 天前 | 只看該作者
    這個(gè)話題真的很重要,值得深入討論。
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